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杭州培养基的质量控制2
杭州培养基的实验室制备
1总则
正确制备培养基是微生物检验的基础步骤之一。使用脱水培养基和其他成分,尤其是含有有毒物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。
使用商品化脱水合成培养基制备培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配置。记录所有相关数据,如质量/体积、pH、制备日期、灭菌条件和制备人员等。
使用各别成分制备培养基时,应按照配方准确配制,记录所有细节信息,如:培养基名称和类型及试剂级别、每个成分物质含量、制造商、批号、pH、培养基体积(分装体积)、无菌措施(包括实施的方式、温度及时间)、配置日期、人员等,以便溯源。
2水
除特定要求,实验室用水的电导率在25℃下应不高于2.5?S/cm(相当于电阻率注0.4MΩcm)。
微生物污染应不超过103CFU/mL,较好低于102CFU/mL。
3称量和复水
称量所需量的脱水培养基(注意防止吸入粉末,尤其是含有有害物质的培养基粉末),先加入少量水,充分混合(庄意避免培养基结块)后再加水至所需的量。
4溶解和分装
脱水培养基加水后适当加热,并不停搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。含琼脂的培养基在加热溶解前应浸泡几分钟。
5 pH的测定和调整
用pH计测定pH,必要时在灭菌前调节pH,除特殊说明外,杭州培养基灭菌后冷却至25℃时,要求pH的变化不超过0.2pH单位。通常使用浓度约为40g/L(约1mol/L)的氢氧化钠溶液或浓度约为36.5g/L(约1mol/L)的盐酸溶液调节pH。如果灭菌后调节pH,溶液需灭菌。
注:商品化培养基在高压灭菌前后pH可能发生明显变化,但使用蒸馏水或去离子水时,灭菌前无需调节pH。
6分装
将配置好的培养基分装到适当的容器中,容器的体积至少为培养基体积的1.2倍。
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